科立得™（固定底物技术酶底物法™）检测试剂

介绍
科立得™可以同时检测水中总大肠菌群和大肠埃希氏菌或者耐热（粪）大肠菌群，是GB/T5750.12-2006国家标准检验方法，其原理是根据爱德士(IDEXX)的专利技术—固定底物技术酶底物法（Defined Substrate Technology DST™）。如果水样中存在总大肠或者耐热（粪）大肠菌群，则它的特异性代谢产物与试剂（MMO-MUG培养基）的主要成分ONPG反应，使溶液显黄色；如水样中有大肠埃希氏菌，则它的特异性代谢产物与MMO-MUG培养基中的MUG反应使溶液显荧光。科立得™可以在24小时内同时检测出总大肠菌群和大肠埃希氏菌或者耐热（粪）大肠菌群，并可以抑制100ml水样中的2百万个杂菌干扰，最低检出限为1cfu（总大肠菌群和大肠埃希氏菌或者耐热（粪）大肠菌群）/100ml水样。

包装
WCHN200: 每包装200个检测试剂，用于检测100mL水样。

储存条件
2-30°C避光储存

定性检测
1. 将一个包装试剂倒入装有100ml水样的无菌取样瓶中
2. 盖上盖子，摇匀。
3. 放在36±1℃培养24小时；或者放在44.5±0.2℃，培养24小时
4. 根据下表的说明判断定性检测结果。

定量检测（用于检测100mL水样）
1. 将一个试剂倒入装有100ml水样的无菌取样瓶中
2. 盖上盖子，摇匀。
3. 将水样全部倒入51孔或97孔定量盘™中，使用专用的程控定量封口机封口。
4. 放在36±1℃培养24小时；或者放在44.5±0.2℃，培养24小时
5. 根据下表的说明读取定量检测结果，数出阳性格子数后对照MPN表得到定量检测结果

检测结果说明

现象	结果
36±1℃或44.5±0.2℃温度下培养24小时，颜色比阳性对比物的黄色浅	总大肠菌群，大肠埃希氏菌阴性耐热（粪）大肠菌群阴性
36±1℃培养24小时，颜色与阳性对照物的黄色相同或颜色更深	总大肠菌群为阳性
44.5±0.2℃培养24小时，颜色与阳性对照物的黄色相同或颜色更深	耐热（粪）大肠菌群阳性
36±1℃培养24小时，颜色与阳性对照物的黄色相同或颜色更深，且在紫外灯下显荧光	大肠埃希氏菌为阳性

• 在暗室中，使用6瓦，366nm的紫外灯在距样品15厘米左右的位置观测是否显荧光。
• 结果应在24-28小时内读取。此外，总大肠菌群和大肠埃希氏菌或耐热（粪) 大肠菌群培养时间小于24小时已经为阳性；或总大肠菌群和大肠埃希氏菌或耐热（粪) 大肠菌群大于28小时依然为阴性，则结果也有效。

实验注意点
• 科立得™试剂可以使用多管法进行检测。检测结果可参阅《水与废水检验标准测试方法》2中的MPN表
• 如果水样品有背景颜色，请做一个空白试验，与科立得™检测结果相比较。
• 如果水样品被稀释，则在读取MPN表时乘以相应的稀释倍数。
• 只可使用灭菌水，不含缓冲液的水，不含氧化剂的水进行样品稀释。
• 科立得™用于常规水样检测，不可以用于浓缩水样。
• 如果样品中含有过多的氯，则加入科立得™可能显蓝光，则该水样不可用。
• 科立得™无需在无菌室中进行,但操作过程应避免微生物污染。

包装参数

包装规格	包装（个/包）	产品编号
Snap试剂包 -（用于检测100-ml水样）	200	WP200I
Snap试剂包 -（用于检测250-ml水样）	20	WP250-2CI
Snap试剂包 -（用于检测250-ml水样）	100	WP250-100I

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